產(chǎn)品名稱：BD Leuko Act Cktl 細(xì)胞因子刺激劑

產(chǎn)品貨號:  550583

產(chǎn)品規(guī)格：200 µL

產(chǎn)品品牌：BD

產(chǎn)品簡介：

通過細(xì)胞內(nèi)染色檢測細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子積累的最關(guān)鍵步驟是分離和激活細(xì)胞群，以誘導(dǎo)產(chǎn)生感興趣的細(xì)胞因子。如果沒有適當(dāng)激活的產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞，在蛋白質(zhì)運輸抑制劑的存在下培養(yǎng)，檢測細(xì)胞因子在細(xì)胞內(nèi)積聚的能力在大多數(shù)情況下會嚴(yán)重受損。各種體外方法已經(jīng)報道刺激細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子。多克隆激活劑在誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞方面特別有用。這些激活劑包括以下:炮豆蛋白A、脂多糖、佛波酯加鈣離子載體或離子霉素、植物血凝素、葡萄球菌腸毒素B和針對TCR/CD3復(fù)合物亞單位的單克隆抗體(含或不含針對共刺激受體的抗體，如CD28)。

PMA (phorbol 12-Myristate 13-Acetate)一種鈣離子載體(Ionomycin)和蛋白質(zhì)運輸抑制劑。這種混合物可能被用來誘導(dǎo)來自T細(xì)胞的主要細(xì)胞因子反應(yīng)。使用這種雞尾酒刺激細(xì)胞會產(chǎn)生細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子位于細(xì)胞因子產(chǎn)生細(xì)胞的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。這種細(xì)胞因子的定位是由蛋白質(zhì)運輸抑制劑成分Brefeldin A引起的，它可以阻斷細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運輸過程。細(xì)胞中細(xì)胞因子蛋白水平的增加，增強了免疫熒光染色和流式細(xì)胞分析對細(xì)胞因子產(chǎn)生細(xì)胞的檢測能力。每100µL小瓶的內(nèi)容物足以處理多達(dá)50 mL的細(xì)胞培養(yǎng)物(在~10^6細(xì)胞/mL);因此可刺激≥5 × 10^7細(xì)胞。

準(zhǔn)備和存儲

在使用前將產(chǎn)品儲存在-80°C或長期存儲庫存溶液。

推薦的試驗程序

使用GolgiPlug:在水浴中在37°C快速解凍雞尾酒，每1 mL細(xì)胞培養(yǎng)(例如，~10^6細(xì)胞/mL)加入2µL的雞尾酒，并*混合。將培養(yǎng)物置于37°C濕化CO2培養(yǎng)箱中4-6小時。

活化后，用FACS染色緩沖液(如 Pharmingen染色緩沖液、胎牛血清，用于抗體染色。

用白細(xì)胞激活雞尾酒治療受刺激的細(xì)胞4至6小時，BD GolgiPlug通過免疫熒光染色顯著提高檢測細(xì)胞因子產(chǎn)生細(xì)胞的能力。推薦GolgiPlug的白細(xì)胞激活雞尾酒在細(xì)胞培養(yǎng)中保存時間不超過12小時。

GolgiPlug被發(fā)現(xiàn)對細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色有不同的影響，是時間、激活劑和細(xì)胞因子依賴的，因此研究人員可能根據(jù)經(jīng)驗確定激活細(xì)胞超過4-6小時的需要。

產(chǎn)品訂購信息：

貨號             名稱                                             規(guī)格

550583  Leuko Act Cktl 細(xì)胞因子刺激劑    2×100 µL

產(chǎn)品名稱：BD Leuko Act Cktl 細(xì)胞因子刺激劑

產(chǎn)品貨號:  550583

關(guān)于公司：

BD 多色流式細(xì)胞術(shù)提供了各種目標(biāo)細(xì)胞亞群的快速、多參數(shù)分析。其應(yīng)用包括免疫學(xué)、免疫腫瘤學(xué)、病毒學(xué)、免疫監(jiān)測等。BD Biosciences開發(fā)了跨越每條激光線的創(chuàng)新染料，以提供多色實驗方案設(shè)計靈活性和全面的偶聯(lián)抗體組合，幫助深度表征表面、細(xì)胞內(nèi)或分泌標(biāo)記物。從簡單到復(fù)雜研究應(yīng)用的流式細(xì)胞儀和分選儀，到廣泛的試劑選擇和教育資源、工具和方案的全面收集，我們支持您有效地管理多色流式細(xì)胞儀工作流程。

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