簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品名稱:G-Biosciences HOOK 6X His蛋白純化試劑盒產(chǎn)品貨號(hào):786-630英文名稱:HOOK™ 6X His Protein Purification產(chǎn)品品牌:G-Biosciences產(chǎn)品規(guī)格:5
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品名稱:G-Biosciences HOOK 6X His蛋白純化試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):786-630
英文名稱:HOOK™ 6X His Protein Purification
產(chǎn)品品牌:G-Biosciences
產(chǎn)品規(guī)格:5
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
HOOK™ 6X His 蛋白純化試劑盒允許從細(xì)菌培養(yǎng)物中純化可溶性 6X His 標(biāo)簽蛋白。細(xì)菌首先被裂解細(xì)菌 PE LB™ 和 PE LB™-溶菌酶釋放總可溶性蛋白質(zhì),同時(shí)保持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和活性。6X His 標(biāo)簽蛋白通過固定化金屬親和層析 (IMAC) 純化,使澄清的裂解液通過預(yù)裝柱。
Bacterial-PELB™ 試劑盒已開發(fā)用于從細(xì)菌細(xì)胞中提取可溶性蛋白質(zhì)。它是對(duì)基于溶菌酶的裂解的專有改進(jìn),它允許提取可溶性蛋白質(zhì)并同時(shí)去除細(xì)胞裂解過程中釋放的核酸(DNA 和 RNA)。Bacterial-PE LB™ 裂解液可消除粘度積聚,從而以較低的離心力實(shí)現(xiàn)有效澄清。
HOOK™ 6X His 蛋白純化試劑盒可用于 鎳 螯合固定化金屬親和層析 (IMAC) 柱或 鈷螯合 IMAC 柱。與鎳螯合樹脂相比,鈷螯合樹脂對(duì) 6X His 標(biāo)簽的結(jié)合親和力較低,這導(dǎo)致非特異性結(jié)合較少,并可能導(dǎo)致產(chǎn)量略低。
HOOK™ 6X His 蛋白純化試劑盒經(jīng)過優(yōu)化,可產(chǎn)生 >10mg/250ml 的可溶性 His 標(biāo)記蛋白培養(yǎng)物,純度為 80-90%,具體取決于蛋白的表達(dá)水平、樹脂類型、構(gòu)象和溶解度特征。
產(chǎn)品特征
從約 250 毫升細(xì)菌中分離出 >10 毫克 His 標(biāo)記的蛋白質(zhì)
無需超聲處理,隨附裂解緩沖液和酶
可提供鎳或鈷樹脂
產(chǎn)品組分:
貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 規(guī)格
Bacterial PE-LB™ 100ml 100ml
PE LB™
-Lysozyme 2 x 1ml 2 x 1ml
Nickel Chelating Columns* 5
Cobalt Chelating Columns 5
His Binding/Wash Buffer 100ml 100ml
His Elution Buffer 100ml 100ml
產(chǎn)品應(yīng)用:
用于從細(xì)菌中分離 6X His 標(biāo)記的重組蛋白
產(chǎn)品使用說明;
在使用HOOK™6X His Protein純化試劑盒之前,推薦對(duì)你的蛋白質(zhì)的表達(dá)和溶解度水平進(jìn)行估計(jì)。
正常表達(dá)蛋白,用Bacterial PE-LB™試劑裂解,澄清
SDS聚丙烯酰胺凝膠的離心和觀察。
•重組蛋白表達(dá)的一個(gè)固有問題是溶解性。一些
在細(xì)菌中表達(dá)的蛋白質(zhì)是不溶的,并定位于包涵體。
提供的細(xì)菌PE LB™可以分離包涵體(見附加協(xié)議)
這些可以用我們的包絡(luò)體增溶(IBS)緩沖液或常用變性劑(8M尿素或6M胍)。
由此產(chǎn)生的可溶性蛋白可以用這個(gè)試劑盒,但變性劑和緩沖液中可能需要還原劑來維持蛋白質(zhì)的溶解性。PELB™溶菌酶:PELB™溶菌酶包含40mg/ml溶菌酶(~80kU)添加800U/ml DNase和24U/ml RNase。我們建議使用PELB™溶菌酶,最終濃度0.1-1mg/ml。溶菌酶水平更高不會(huì)提高裂解效率,可能有抑制作用。
為了保持重組蛋白的完整性,建議使用蛋白酶抑制劑混合物在整個(gè)純化過程中使用。的使用的凈化技術(shù)依賴于金屬螯合,因此要避免使用EDTA或其他金屬螯合劑作為抑制劑的蛋白酶抑制劑混合物。我們推薦RecomProteaseARREST,蛋白酶抑制劑專為從細(xì)菌中純化重組蛋白而設(shè)計(jì)的雞尾酒ProteaseARREST,一種通用的蛋白酶抑制劑可選的EDTA。
•在此之前,樹脂和緩沖液應(yīng)達(dá)到室溫平衡
產(chǎn)品名稱:G-Biosciences HOOK 6X His蛋白純化試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):786-630
關(guān)于公司:
Geno科技公司的成立旨在簡(jiǎn)化生命科學(xué)研究。我們的主要目標(biāo)是瞄準(zhǔn)蛋白質(zhì)研究的關(guān)鍵技術(shù),并找到負(fù)擔(dān)得起的方法來簡(jiǎn)化和改進(jìn)這些技術(shù)。多年來,Geno技術(shù)公司已經(jīng)擴(kuò)展到其他研究領(lǐng)域,但我們的主要目標(biāo)仍然是蛋白質(zhì),我們的主要目標(biāo)"簡(jiǎn)化和改進(jìn)這些技術(shù)"仍然成立。2010年,隨著"蛋白質(zhì)人"的演變,這一信息得到了強(qiáng)化,我們的標(biāo)志性吉祥物和G-BioSciences品牌,Geno科技公司的注冊(cè)商標(biāo)。
G-Biosciences 的團(tuán)隊(duì)檢查了特定實(shí)驗(yàn)技術(shù)的方方面面,從蛋白質(zhì)提取到蛋白質(zhì)純化和檢測(cè),以確定我們可以瞄準(zhǔn)的關(guān)鍵領(lǐng)域進(jìn)行改進(jìn)。因此,我們現(xiàn)在制造的一切,從簡(jiǎn)單的緩沖器在方便的濃度和大小,定制制造的設(shè)備,如管O-Dialyzer,增強(qiáng)和簡(jiǎn)化關(guān)鍵技術(shù)。我們重點(diǎn)研究的關(guān)鍵領(lǐng)域包括但不限于蛋白質(zhì)檢測(cè)、樣品制備、電泳、西印、質(zhì)譜測(cè)量、檢測(cè)開發(fā)、抗體生產(chǎn)和蛋白質(zhì)純化。
G-BioScience現(xiàn)在為蛋白質(zhì)和生命科學(xué)研究市場(chǎng)提供了數(shù)千種產(chǎn)品,所有這些產(chǎn)品的設(shè)計(jì)都希望使研究人員的實(shí)驗(yàn)室時(shí)間更簡(jiǎn)單、更實(shí)惠。